產品中心
PRODUCT CENTER
一步法脫落細胞DNA純化試劑盒
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貨號 |
產品名稱 |
規格 |
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AS101 |
BcMag ? 一步法脫落細胞DNA純化試劑盒 |
50 preps |
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AS102 |
BcMag ? 一步法脫落細胞DNA純化試劑盒 |
10 preps |
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組件 |
存儲條件 |
50preps，目錄號AS101 |
100 preps，目錄號AS102 |
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BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
運輸和儲存：根據上表，在收到商品時儲存試劑盒中各組分。
簡介
脫落細胞DNA是指從丟失的皮膚細胞和其他生物材料中收集的DNA，這些生物材料通常指手指、手掌、腳趾和腳掌上的指紋突起部位留在觸摸表面的脫落細胞。這一生物技術在盜竊、性暴力到謀殺等一系列刑事案件的取證中起著極為重要的作用。例如，在謀殺或性侵犯案件中，可以通過研究用于盜竊的車輛的方向盤，或在謀殺和性侵案件中的武器和衣物，來收集非常有價值的犯罪者的DNA證據。此外，從犯罪現場收集“脫落細胞DNA”以確定犯罪嫌疑人可能非常有價值，特別是在沒有其他類型的證據的情況下。
通常，DNA分析過程始于從法醫檢樣中提取DNA。DNA的提取和回收過程是DNA分析過程中最關鍵的一步。幾乎所有的實驗都需要足夠數量的，經過定量和定性的DNA才可以完成。因此在法醫鑒定中，DNA鑒定能否成功取決于現有DNA模板的可用性。所以，就需要更好的DNA提取回收方法，尤其是在處理含有微量DNA的脫落細胞樣本時。各種各樣的方法被用來增加證據DNA的數量和質量。然而，由于提取方式的不同和定量方法的準確性差異，DNA提取過程可能導致初始脫落細胞含有的DNA的20%至90%損失掉。而且，目前用于法醫DNA案件的純化技術耗時且過程繁瑣。
此外，對于使用純化柱進行純化操作的方式很容易導致DNA丟失，從而使低拷貝或受損的脫落細胞樣本的分型實驗失敗。因此，直接PCR擴增法被提出作為避免脫落細胞樣本DNA丟失的方法之一。該技術不需要提取、定量和濃縮等步驟，可以最大程度保留生物樣本中的DNA。同時，可以最大程度減少不同的實驗室員操作帶來的誤差和樣本處理過程中的DNA污染，并減少樣本操作過程的處理時間和成本。然而，許多DNA樣本需要直接從固體物質上提取，如衣服、室內裝潢材料、紙張、口香糖和煙頭等，但直接從這些固體上提取核酸，就會造成提取出的DNA攜帶高濃度的PCR抑制劑。Bioclone公司開發了一種全新的基于磁珠法的一步DNA純化系統，可以克服以上這些缺點。
BcMag? One step Touch DNA Direct Kit使用新型負相色譜磁珠，可以從大多數微量脫落細胞樣本中快速提純出更高質量和更高回收率的DNA。這些樣本包括體液、污漬、體液拭子、脫落細胞、煙頭、毛囊、指甲刮屑、上皮細胞、咬痕、精液等掉落的生物體細胞DNA樣本等。經過特殊設計的磁珠表面具有我們專有的表面化學功能基團，一旦與樣品混合，可同時裂解細胞并捕獲PCR抑制劑（圖1）。
然后用磁力架去除磁珠-PCR抑制劑的復合物，同時保留在溶液中的純凈DNA可用于下游STR分析。本款核酸純化試劑盒提供了一種全新的快速簡單的DNA純化方法，只需一個試管，無需反復的溶液轉移，純化過程不需要載體RNA。同時，這種核酸提取方式還減少了DNA丟失的風險，以及提取緩沖液在傳統核酸提取的，結合-洗滌-洗脫程序中可能帶來的污染和DNA丟失風險。在將樣本完全裂解后，它能夠在不到15分鐘的時間內處理96個樣品，實際手動操作時間不會超過1分鐘。
圖2： 脫落細胞 DNA純化的原理和工作流程
1.向生物樣品中添加功能磁珠。
2.將樣品與磁珠和蛋白酶K混合并裂解細胞。
3.通過旋渦/移液吹吸方式對磁珠進行混合，以捕獲PCR抑制劑。
4.用磁力架沉淀磁珠。
5.吸取含有純凈DNA的上清液
應用方向
純化的DNA適用于敏感的下游應用，如PCR、qPCR、單核苷酸多態性（SNP）、短串聯重復序列（STR）基因分型、基因分型或新一代測序（NGS）。
特點及優勢
l 快速高效的純化方案：無需液體轉移，只需一個試管，無需事先分離DNA，可直接用于放大實驗的工作流程。
l 節約時間成本：可在不到一小時內處理96個樣本。
l 最高的核酸回收率：提取過程中的DNA損失最小。
l 有效去除抑制劑（圖1）：多酚化合物、腐殖酸/黃腐酸、酸性多糖、鞣質、黑色素、肝素、洗滌劑、牛仔布染料、二價陽離子，如Ca2+、Mg2+等。
l 性價比高：無需離心柱、過濾器、不用反復的重復移液和使用有機試劑。
l 可用于高通量實驗：與許多不同的全自動核酸提取系統兼容。
本產品用于法醫學、人類鑒定和親子鑒定分子生物學應用。本產品不適用于疾病診斷、預防或治療。
一般參考文獻
1. Van Oorschot, R., Jones, M. DNA fingerprints from fingerprints. Nature 387, 767 (1997).
2. Tang J, Ostrander J, Wickenheiser R, Hall A. Touch DNA in forensic science: The use of laboratory-created eccrine fingerprints to quantify DNA loss. Forensic Sci Int Synerg. 2019 Oct 23;2:1-16.
3. Jo-Anne Bright, Susan F. Petricevic. Recovery of trace DNA and its application to DNA profiling of shoe insoles, Forensic Science International,Volume 145, Issue 1, 2004,Pages 7-12
4. Tang J, Ostrander J, Wickenheiser R, Hall A. Touch DNA in forensic science: The use of laboratory-created eccrine fingerprints to quantify DNA loss. Forensic Sci Int Synerg. 2019 Oct 23;2:1-16.
